1.
연구 주제
UTI bacteria enrichment & colorimetric detection with AI (w/정수)
2.
연구 목표
요로감염을 유발하는 박테리아 검출 시 sensitivity, specificity를 높이고 시간은 단축시킬 수 있도록
PES membrane 이용하여 박테리아를 농축하고, WST 이용하여 비색 반응 확인.
추후에는 AI를 이용해 정량 분석이 가능하도록 구현할 예정
3.
연구 방법
1단계: E.coli preconcentration
2단계: WST assay
* WST assay
•
원리: 세포 내 mitochondrial dehydrogenase에 의해 tetrazolium salt 에서 formazan이라는
발색물질이 생성되며, 이를 측정하여 세포증식이나 독성 등을 분석할 수 있음
Cell viability assay 실험 절차 (WST-8 brochure참고) | |
1 | 배양한 세포를 배지에 풀어 현탁액 준비
(5X10^3~1X10^4 cells/well) |
2 | 96well microplate에 준비한 세포 현탁액을 100uL 분주 |
3 | CO2 세포배양기에서 24~48 h 배양 |
4 | 시약을 10uL (media volume의 10%)를 각 well에 처리 후 30min~4h 동안 CO2 incubator 배양 |
5 | 흡광도 측정하기 전 shaking |
6 | colorimetric microplate reader로 450nm에서 측정 |
•
실험 design, 조건
2) 3mL of E.coli (in DW)
3) 100uL WST-1
4) 37°C, 30 min
•
향후 일정 (Timeline) - 실험, 논문, 특허 등
현재 WST시약 주문 완료, E.coli 배양 (연정)
4~5월 중 실험